合成FITC-COOH(Fluorescein-Carboxylic Acid)的实验步骤和条件可以按照以下一般性流程进行:
1. 实验材料和试剂准备:
- FITC(Fluorescein Isothiocyanate)作为起始物质
- 氨基化剂,如氨或胺
- 活化试剂,如N,N’-环己基碳二亚胺(EDC)和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)
- 有机溶剂,如二甲基亚砜(DMSO)或二甲基甲酰胺(DMF)
- 溶剂萃取剂、柱层析介质等用于纯化的试剂
2. 氨基化反应:
- 将适量的FITC溶解在无水的有机溶剂(如DMSO或DMF)中。
- 加入氨基化剂(如氨或胺),使FITC与氨基化剂反应。
- 在适当的反应条件下,将反应混合物搅拌或加热,反应时间根据具体实验条件而定。
3. 活化和偶联反应:
- 将活化试剂(如EDC和NHS)加入氨基化反应产物中。
- 在适当的反应条件下(如pH和温度),将反应混合物搅拌或加热。
- 加入待偶联的目标分子(如氨基化合物),使其与FITC-COOH发生共价连接反应。
- 反应时间和反应条件根据具体实验设计而定。
4. 纯化和分离:
- 对反应混合物进行纯化,以去除未反应的试剂和杂质。
- 常用的纯化方法包括溶剂萃取、柱层析或凝胶过滤等,根据实验需要选择合适的纯化方法。
5. 结构鉴定和验证:
- 使用质谱分析(如质谱仪)和核磁共振(如NMR)等技术对合成的FITC-COOH进行鉴定和验证,确保其结构和纯度。
需要注意的是,具体的实验步骤和条件可能因实验设计、实验室设备和试剂选择的不同而有所变化。此外,在进行实验时,应遵循实验室安全操作规程。
Cy5-LCA-3-Sulfo
Cy3-藤黄酸
Cy5.5-甘露糖
Cy5-胆酸
Cy5-3-吲哚丙酸
Cy5.5-Glucese
Cy5.5-CMCS
Cy3-LPS
sulfo-Cy5-没食子酸
Cy5.5-N-乙酰半胱氨酸
Cy5.5-甘氨鹅去氧胆酸
DSPE-PEG2K-CY5
DBCO-PEG2K-CY3
CS30K-CY5.5
DBCO-PEG2K-CY7
chol-PEG3.4K-CY5
PLA5K-PEG5K-CY5
PLA2K-PEG2K-CY5
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